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        細胞的細胞毒性實驗有哪些方法
         2021年01月22日 |閱讀次數:872
        CCK-8實驗:
        全稱為Cell Counting Kit-8,在電子載體1-Methoxy PMS存在的情況下能夠被細胞內脫氫酶還原成水溶性的甲臜染料,生成的(橙黃色)甲臜量與活細胞數量成正比,即顏色的深淺與細胞的增值成正比。因此可以用這一特性直接進行細胞增殖和毒性分析。

        MTT
        MTT全稱 3-(4,5-二甲基噻唑-2)-2,5-二苯基四氮唑溴鹽, 活細胞線粒體中的琥珀酸脫氫酶能使MTT還原為水不溶性的藍紫色結晶甲臜(Formazan)并沉積在細胞中,而死細胞無此功能。對于細胞樣本加入MTT試劑反應,形成甲臜結晶。隨后加入二甲基亞砜(DMSO)重新溶解細胞中的甲臜,得到紫色混合液。用酶標儀在490nm波長處測定其光吸收值。細胞存活率=(實驗組吸光度值-空白組吸光度值)/(對照組吸光度值-空白組吸光度值)*100%。

        兩者區別:加入CCK-8后活細胞生成的具有高度水溶性的黃色甲瓚產物,由于其毒性較小,需要摸索檢測時間,而加入MTT后活細胞生成的為水不溶性的藍紫色結晶甲瓚
        CCK-8對細胞毒性較小,這也是與MTT區別較大的地方。

        對于懸浮細胞來說,建議使用cck8法,因為MTT檢測的是細胞內的物質,加入MTT4h以后,需要先將MTT吸出,再加DMSO溶解,這一步驟容易造成很大誤差,CCK8法可以規避這一風險。

        細胞毒性實驗


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